【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng):抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP) 檢測(cè)試劑盒 (酶聯(lián)免疫法)
【包裝規(guī)格】
48 人份/盒、96 人份/盒
【預(yù)期用途】
該產(chǎn)品供醫(yī)療機(jī)構(gòu)用于定性測(cè)定人血液中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP)或定量測(cè)定人血液中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP)濃度 ,用于輔助診斷。
【檢驗(yàn)原理】
本品采用間接ELISA法檢測(cè)抗CCP抗體,其基本原理是:包被的抗原為環(huán)瓜氨酸肽(CCP),包被在酶標(biāo)板表面,將稀釋后的待檢血清/血漿和對(duì)照物加入反應(yīng)板孔中,如果被檢血清/血漿中存在抗環(huán)瓜氨酸肽抗體,經(jīng)溫育后,則血清/血漿中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體與反應(yīng)板孔中的 CCP抗原多肽結(jié)合,形成固相抗原-抗體復(fù)合物,洗去未結(jié)合的血清/血漿中其它成分,加入酶標(biāo)記的抗人IgG抗體,溫育,固相CCP抗原結(jié)合抗CCP抗體再與酶標(biāo)記的抗人IgG抗體結(jié)合,洗去未結(jié)合的酶標(biāo)記抗體成分,加入酶底物,并被催化成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色的深淺可對(duì)抗環(huán)瓜氨酸肽抗體進(jìn)行定量或定性測(cè)定。
【主要組成成分】
酶結(jié)合物:Na2HPO4.12H2O;NaCl;KCl;KH2PO4;小牛血清;山羊血清;指示劑1;硫柳汞;酶標(biāo)抗人IgG。
樣品稀釋液:Tris Base;NaCl;酪蛋白鈉;牛血清白蛋白;吐溫-20;曲拉通X-100;山羊血清;硫柳汞。
抗CCP陽(yáng)性對(duì)照及校正品稀釋液:Na2HPO4.12H2O;NaCl;KCl;KH2PO4;乙二醇;小牛血清;硫柳汞;指示劑1。
抗CCP陰性對(duì)照: Na2HPO4.12H2O;NaCl;KCl;KH2PO4;硫柳汞;乙二醇;陰性血清;指示劑2。
陽(yáng)性對(duì)照:抗CCP陽(yáng)性對(duì)照及校正品稀釋液;陽(yáng)性血清。
弱陽(yáng)性對(duì)照:抗CCP陽(yáng)性對(duì)照及校正品稀釋液;陽(yáng)性血清。
顯色劑A:檸檬酸;過(guò)氧化尿素。
顯色劑B:檸檬酸;乙二胺四乙酸二鈉;TMB。
終止液: 濃硫酸。
洗滌液: Na2HPO4.12H2O;NaCl;KCl;KH2PO4;吐溫-20。
主要組成:
(1) |
CCP抗原包被板 |
1塊 96人份 |
|
1塊48人份 |
(2) |
酶結(jié)合物 |
1瓶10ml |
|
1瓶5ml |
(3) |
陽(yáng)性對(duì)照 |
1瓶1ml |
|
1瓶1ml |
(4) |
陰性對(duì)照 |
1瓶1ml |
|
1瓶1ml |
(5) |
洗滌液(用前1:20稀釋?zhuān)?/span> |
1瓶50ml |
|
1瓶50ml |
(6) |
顯色劑 A |
1瓶6ml |
|
1瓶3ml |
(7) |
顯色劑B |
1瓶6ml |
|
1瓶3ml |
(8) |
終止液 |
1瓶6ml |
|
1瓶3ml |
(9) |
樣品稀釋液 |
2瓶50ml |
|
1瓶50ml |
(10) |
弱陽(yáng)性 |
1瓶1ml |
|
1瓶1ml |
(11-15) |
校正品系列 |
5瓶*1ml |
|
5瓶*1ml |
(16) |
說(shuō)明書(shū) |
1份 |
|
1份 |
(17) |
不干膠片 |
3張 |
|
3張
|
【儲(chǔ)存條件及有效期】
儲(chǔ)存條件:于2-8℃保存,在有效期內(nèi)使用
有效期:12 個(gè)月
生產(chǎn)日期及失效期見(jiàn)標(biāo)簽。
【適用儀器】
自動(dòng)酶標(biāo)測(cè)定儀,主波長(zhǎng):450nm,參考波長(zhǎng):630nm
【樣本要求】
血清或血漿,由靜脈采血后離心獲得,不能反復(fù)凍融,標(biāo)本在2-8℃可保存一周。
【檢驗(yàn)方法】
(1)每次試驗(yàn)設(shè)空白對(duì)照一孔(不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步相同),陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、弱陽(yáng)性對(duì)照各兩孔,定量檢測(cè)時(shí)還需設(shè)校正品5個(gè)濃度各一孔。待測(cè)樣本用樣品稀釋液1:100稀釋后加100μl到微孔板中,混勻置37℃溫育60分鐘。棄去孔內(nèi)樣品,扣干。
(2)用洗滌液注滿(mǎn)每孔(至少400μl洗滌液/孔),勿溢出,靜置5秒鐘后扣干,重復(fù)5次。
(3)每孔分別加入100μl酶結(jié)合物,室溫孵育30分鐘。同上法洗反應(yīng)板5次。
(4)每孔加顯色劑A液、B液各50μl,輕輕振蕩后,37℃避光靜置15分鐘。
(5)每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),以空白調(diào)零,在酶標(biāo)儀中讀取各孔OD450。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1、 對(duì)于定性測(cè)定:
(1) 結(jié)果計(jì)算:各測(cè)定吸光度值(包括對(duì)照和樣品)減去空白對(duì)照值,然后計(jì)算對(duì)照和樣品的絕對(duì)吸光度比值:
對(duì)照或樣品吸光度值(OD450)
吸光度比值=-----------------------------
弱陽(yáng)性對(duì)照吸光度值(OD450)
(2)結(jié)果判斷: |
吸光度比值 |
結(jié)果解釋 |
|
< 0.95 |
陰性 |
|
≥0.95,≤1.0 |
邊界值,建議重新測(cè)定 |
|
>1.0 |
陽(yáng)性 |
2、對(duì)于定量診斷:
(1)結(jié)果計(jì)算:以5個(gè)校正品(校正品A 100 RU/ml、校正品B 50 RU/ml、校正品C 25 RU/ml、校正品D 12 RU/ml、校正品E 6 RU/ml)的相對(duì)濃度(Log函數(shù),X-軸)及其吸光度(線性,Y-軸)作標(biāo)準(zhǔn)曲線,據(jù)此求出血清中抗-ccp抗體的濃度?捎糜(jì)算機(jī)采用曲線擬合方式來(lái)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:四參數(shù)對(duì)數(shù)、五參數(shù)對(duì)數(shù)、spline擬合、對(duì)數(shù)/對(duì)數(shù)曲線或lim/limit曲線。如果血清樣本的吸光度超出了校正品A(100RU/ml),診斷結(jié)果可報(bào)告為>100RU/ml。同時(shí)建議選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)將血清重新稀釋后再測(cè)定,如1:400,從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的數(shù)據(jù)乘以4即為樣本中ccp抗體濃度。
(2)結(jié)果判斷:≤12RU/ml:陰性
>12RU/ml:陽(yáng)性
【檢驗(yàn)方法的局限性】
本品僅用于體外檢測(cè)血清或血漿中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(抗CCP),用于類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人的輔助診斷。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1生物安全性:用于制備陽(yáng)性對(duì)照品、弱陽(yáng)性對(duì)照品、陰性對(duì)照品的血清,需經(jīng)生物安全性檢測(cè)即乙型肝炎病毒表面抗原檢測(cè)為陰性、丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)為陰性、人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV-1/2)抗體檢測(cè)為陰性。
2試劑外觀:液體組分應(yīng)為澄清液體。
3裝量:試劑裝量≥標(biāo)示裝量。
4試劑空白吸光度:≤0.05。
5試劑靈敏度:測(cè)定試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)液E(相當(dāng)于6RU/ml),吸光度范圍在0.06-0.16。
6準(zhǔn)確度:測(cè)定試劑盒內(nèi)校準(zhǔn)液B(相當(dāng)于50RU/ml),吸光度范圍在1.0-2.0。
7線性范圍:在6~100RU/ml范圍內(nèi),計(jì)量-反應(yīng)曲線的相關(guān)系數(shù)(r)≥0.95。
8陰性參考品符合率:對(duì)10份陰性參考品測(cè)定,應(yīng)全部檢出陰性。
9陽(yáng)性參考品符合率:對(duì)10份陽(yáng)性參考品測(cè)定,應(yīng)全部檢出陽(yáng)性。
10精密性:用精密性參考品測(cè)定,CV≤15%(n=10)。
11穩(wěn)定性試驗(yàn):37℃放置6天或2-8℃12個(gè)月檢定結(jié)果應(yīng)達(dá)到上述2、4~10標(biāo)準(zhǔn)。
【注意事項(xiàng)】
(1)濃縮洗滌液使用前,用蒸餾水稀釋20倍后使用。
(2)不同批號(hào)試劑不可混合使用。
(3)必須嚴(yán)格控制溫育反應(yīng)板的溫度和時(shí)間。
(4)結(jié)果判定以?xún)x器測(cè)定為準(zhǔn),不能憑肉眼觀察。
(5)當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照OD值≥1.80并且陰性對(duì)照OD≤0.12時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果是有效的。
醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證編號(hào):滬食藥監(jiān)械生產(chǎn)許20030955號(hào)
【醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào)/產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)】
【說(shuō)明書(shū)核準(zhǔn)日期及修改日期】